CTL33132:   Semikvantitativní stanovení protilátek ve třídě IgG a IgM proti viru spalniček metodou ELISA

Název metody na výsledcích laboratorního vyšetření:

Morbilli IgM

Indikace:

Vyšetření je indikováno při podezření na infekci virem Morbilli. Virus spalniček neboli morbilli virus patří mezi RNA viry z čeledi Paramyxoviridae. Viriony jsou kulovitého tvaru o průměru 150-250 nm a skládají se z ribonukleoproteinové složky s helikální symetrií a obalu s hrotovitými výběžky, které nesou kmenově specifické antigeny vyvolávající hemaglutinaci. Virus spalniček nemá neuraminidázovou aktivitu. Spalničky jsou klasickým dětským onemocněním, virus se vyskytuje endemicky - protilátky lze nalézt u 90% populace do věku 20 let. Novorozenci jsou chráněni mateřskými protilátkami do 3-4 měsíců věku; prodělané onemocnění zanechává celoživotní imunitu. Virus spalniček má index nakažlivosti okolo 96%, je celosvětově rozšířený a onemocnění může mít vážný průběh. V preantibiotické době bývala vážnou hrozbou bakteriální superinfekce, nyní je prognóza u nekomplikovaných spalniček dobrá. Po odeznění akutní fáze spalniček mohou nastat komplikace postihující CNS jako encefalomyelitida (0,1%), které se stále vyznačují vysokou mortalitou (10%). Výhled na uzdravení těchto pacientů je špatný. Přibližně 10-30% těchto případů končí fatálně; 20-50% pacientů nesou vážné poškození. Zřídka se vyskytující (1:1000) degenerativní onemocnění CNS - subakutní sklerotisující panencefalitida (SSPE) - je považována za pomalou infekci virem spalniček.

Spalničky jsou vysoce nakažlivé virové onemocnění, charakteristické makulopapulárním exantémem, specifickými prodromy jako je horečka, rýma, konjunktivitida, kašel a přítomností exantému v dutině ústní (Koplikovy skvrny). Spalničky jsou jedním z nejnakažlivějších infekčních onemocnění. Virus se šíří kapénkovou infekcí z dýchacích cest infikovaných osob nebo přímým kontaktem. Onemocnění vzniká v důsledku infekce virem spalniček, rod Morbillivirus, čeleď Paramyxoviridae. Incidence spalniček se od zavedení očkování snížila. Po 10 až 12 denní inkubační době se objevují charakteristické prodromální symptomy: rýma, perzistentní štěkavý kašel, keratokonjunktivitida, často s fotofobií a horečka. Obecně může být častá také lymfadenopatie a splenomegalie. Během tohoto období se na bukální sliznici objevují také Koplikovy skvrny, které se rychle rozšiřují a postupně postihují celou sliznici. Tyto skvrny obvykle zmizí ještě před maximálním výsevem kožních morf. Spalničkové vyrážky se objevují po 3 až 5 denním prodromálním stadiu. Morfy rychle mění charakter na makulopapulární a v průběhu dalších 3 dnů se rozšiřují na obličej, krk, trup a končetiny. Na vrcholu infekce jsou erupce červeně fialové a mohou být spojeny s kožním edémem. Mezi komplikace patří: otitis media, pneumonie a encefalitida. Spalničky mají závažnější průběh u mladších nebo podvyživených dětí s vyšší incidencí hemoragické formy s mortalitou 5 až 10 %. Porucha buněčné imunity se muže projevit rozvojem sekundárních bakteriálních infekcí (pneumonie, otitida, mesotitida, průjem, ale i reaktivace dosud latentní tuberkulózy). Tyto bakteriální superinfekce mohou mít velmi závažný průběh. Nepřímá diagnostika je založena na vyšetřeni protilátek ve třidě IgM a IgG. Nejvhodnější doba odběru je mezi 4. a 28. dnem výsevu exantému (72 hodin po výsevu exantému je až 30 % sér falešně negativních).

Pozitivita postvakcinačních IgM protilátek obvykle trvá do 6. týdne (11. týdne) od aplikace vakcíny. Negativita IgM protilátek nevylučuje onemocnění spalničkami, a proto vyšetření musí být doplněno o vyšetření párového vzorku séra odebraného minimálně 10 dní po prvním vzorku séra. Laboratorním potvrzením infekce virem spalniček je sérokonverze IgM protilátek. Detekce IgG protilátek v párovém séru: minimální doba mezi oběma odběry krve je 10 dní, vzorky se musí testovat současně. Laboratorním potvrzením infekce virem spalniček je sérokonverze nebo několikanásobný vzestup IgG protilátek. K validní interpretaci laboratorních výsledků je nezbytné znát datum počátku klinické manifestace, klinický obraz a epidemiologické údaje, včetně statusu očkování. Detekce IgG protilátek a jejich protektivita: osoby s pozitivním nálezem specifických spalničkových IgG protilátek jsou považovány za imunní. Postvakcinační protilátky IgG se objevují přibližně mezi 12. až 15. dnem po očkování a vrchol jejich tvorby je mezi 21. až 28. dnem. Kritéria laboratorně potvrzeného případu platí plně pro primoinfikované, kde do třetího až čtvrtého dne po výsevu exantému detekce IgM protilátek pozitivní u 60 - 70 % nemocných, nebo za 3 týdne dochází k signifikantnímu vzestupu IgG protilátek v párovém séru. U vakcinovaných sérologický průkaz infekce obtížný: IgM protilátky často nevytvoří vůbec kvůli rychlému vzestupu preexistujících IgG protilátek. Ze stejného důvodu u vakcinovaných nedochází vždy ani k signifikantnímu vzestupu IgG protilátek při vyšetření párového vzorku séra
Komplikace: encefalomyelitida, snížení intelektuálních schopností, které vede k téměř kompletní ztrátě mozkových funkcí a smrti.Virus spalniček je přenášen vzduchem nebo kontaktem a infikuje respirační trakt.
Inkubační doba je 11 - 14 dnů.

Prevencí proti spalničkám je plošné očkování obyvatelstva, v ČR je součástí vakcíny Priorix a Priorix Tetra.

Jednotky:

index

Dostupnost pro rutinní vyšetření:

Pracovní dny

Dostupnost pro statimová vyšetření:

Není statimové vyšetření

Odezva pro rutinní vyšetření:

do 5 pracovních dnů

Odezva pro statimová vyšetření:

není statimová

Druh odběrového materiálu:

Dle typu materiálu pro laboratorní stanovení – kapitola C.6.1. –  Laboratorní příručky

Typ materiálu odebíraného:

venózní krev

Odebírané množství vzorku:

5 ml

Typ materiálu pro laboratorní stanovení:

Doporučeným typem vzorku je sérum a plazma (heparin, EDTA, ACD a citran sodný)

Množství pro analýzu včetně mrtvého objemu:

200µl

Stabilita odebíraného materiálu 20-25 °C:

1 den

Stabilita materiálu pro stanovení 20-25 °C:

1 den

Stabilita materiálu pro stanovení 4-8 °C:

1 týden

Stabilita materiálu pro stanovení -20 °C:

neuvedeno

Nejistota měření:

Neuvádí se

Mez detekce:

Neuvedeno

Interference:

U tohoto ELISA testu nebyla pozorována žádná interference s hemolytickými, lipemickými ani ikterickými vzorky pro koncentrace dosahující 10 mg/ml u hemoglobinu, 20 mg/ml u triglyceridů a 0,4 mg/ml u bilirubinu. Při pozitivitě IgM protilátek - vyloučit zkříženou reakce proti viru zarděnek, parvoviru B19, EBV a HHV6 (zejména u sporadických případů).

Referenční rozmezí:
VěkPohlavíReferenční rozmezí
0 - 99 let a staršíbez rozlišení0 - 0.8 [index]
Komentář k referenčnímu rozmezí:
Interpretace výsledků:
Semikvantitativní vyhodnocení IgM: 
Výsledky je možné semikvantitativně vyhodnotit výpočtem poměru extinkční hodnoty 
kontrolního nebo pacientova séra a extinkční hodnoty kalibračního séra. Pro výpočet poměru 
použijte následující formuli: 
Extinkce kontrolního nebo pacientova séra ---------------------------------------------------------- = Poměr Extinkce kalibračního séra
EUROIMMUN doporučuje interpretovat výsledky následovně: Negativní Poměr < 0,8 Hraniční Poměr ≥ 0,8 až < 1,1 Pozitivní U/ml vzorku ≥ 1,1
Zdroje variability:

Neuvedeno

Vybrané kapitoly SOP:

SOP-SER02

Datum revize:
26.04.2023 13:19:00
Vytvořil:
PhDr. Veľková Ivana